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一文在手掌握溶出方法学验证

一文在手掌握溶出方法学验证

时间:2022-09-08 08:43:15 作者:华体会官网在线登录 来源:华体会平台登录
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  或许人逢假期无心事,或许疫情期间更恐慌,但充实而有计划的学习,仍可以激起大家对生活无限的热爱,没理由不卷起来。先来张图片给大家提提神。

  这个动态大家肯定已经关注到了。对于药物质量研究来说,分析方法的开发和验证的重要性,小编在此就不再赘述了。而对于溶出度方法学验证来说,您是否具有相同的疑问?

  2、溶出方法验证中,除了标准介质以外,其他几个介质也需要同样的方法验证吗?

  巨大的工作量之前,大家更应该熟练掌握细节,做好计划,写好方案,减少偏差。

  ICH Q2中出现的这个表格,对于大家来说,简直不能再熟悉。那接下来我们就继续展开一下方法验证的详细过程吧!

  根据预实验制定的验证方案,包括前期方法优化简介、验证项目及验证目的、操作要求和可接受标准;

  对于溶出实验方法而言,还需要特别注意的一点是:取样时所采用的过滤装置,如滤膜、滤头等,必须要经过药物的吸附验证,防止对测定结果产生一定干扰。这一部分应在溶出方法开发阶段做充分的论证研究。

  具体操作方法可按处方比例配制空白辅料(含油墨或胶囊壳)的混合样品,将该混合样品溶解或分散在溶出介质中,然后向溶液中加入一定量药物,作为供试品溶液;

  对照品溶液和供试品溶液的峰面积相差不超过10%,也就是说对照品溶液和供试液的浓度不要相差太大,因为不同的稀释倍数,稀释过程中所用的试剂、玻璃容器、溶出介质、都有可能造成专属性的误差。

  胶囊剂应配置空胶囊壳溶出液(严格按照样品溶出度测定的步骤,取6粒空白胶囊壳进行试验。尽可能完全的除尽胶囊内容物)。

  取这3种溶液适量,做紫外检测,记录吸光度,根据对照品溶液结果,测定干扰值。

  如果是胶囊产生的干扰试验,应进行囊壳的消除试验。首先空胶囊仅对UV测定有干扰,药典规定如干扰不大于标示量的2%,可忽略不计;干扰大于标示量的2%,可更换波长或者再换一种其他胶囊壳,减少测定干扰。

  胶囊壳的批次、来源不用、紫外吸收强度也各不相同,故干扰也常常不同。若胶囊壳的干扰较大时,建议采用HPLC法进行测定。

  取对照品溶液适量,在室温下放置,分别于不同时间点测定吸光度值/峰面积值,计算其RSD值。

  取自制样品适量,用相应介质制备成供试液,在室温下放置,分别于不同设置时间点测定吸光度值/峰面积值,计算其RSD值。

  取每时间点的主峰峰面积/吸光度值,计算其RSD值,应不大于2%,则说明该溶液在此时间段内的稳定性良好。

  采用UV法考察稳定性时,一般稳定性做到24小时即可,缓控释制剂可相对延长时间。

  采用HPLC法考察稳定性时,一般需满足一条溶出曲线所有样品测定完全的时间。

  如果溶液不稳定,还需要考虑温度(降低进样室温度或在冰箱冷藏)、避光、增加稳定剂等提高稳定性的方式。

  例如考虑到成本问题,对于稳定性很好的对照品,可以配置成贮备液使用,但是需要考察日间稳定性(日间稳定性就是另外一个实验方案了)。

  取待测样品1片/粒,置溶出杯中,按照溶出度方法进行测定,至取样点时取溶出液,分为6份,分别进行溶出度测定,计算RSD值。

  为避免溶出曲线中低浓度点的精密度,可以在第1个取样点时取溶出液,分为6份,分别进行溶出度测定,计算RSD值。

  在同一实验室内的条件改变,如不同时间、不同分析人员、不同设备等测定结果之间的精密度。研究过程中的典型的变化,包括不同天、不同操作人员和设备。

  测定结果与重复性的结果合并计算,HPLC峰面积/吸光度RSD不超过2.0%(n=12)。而USP 建议:当该时间点的溶出量小于85%时,两个分析员溶出结果的平均值相差不得超过10%;当该时间点的溶出量大于85%时,两个分析员溶出结果的平均值相差不得超过5%。当然,具体的可接受标准可根据特定产品做具体规定。

  取对照品适量,配成一定浓度的储备液,稀释制成一系列浓度的溶液,通常至少5个浓度点(参见USP)。

  对于溶出度试验,应为规定范围的±20%,对于缓控释制剂,该限度照样适用。如某缓释胶囊溶出度限度为第1小时:15%~45%,则回收率应为最低点15%的±20%。

  以峰面积(吸光度值)对浓度进行线。y轴截距的绝对值不超过100%浓度样品峰面积的2%。

  UV法:最佳吸光度在0.3~0.7之间,根据具体样品也可以0.2~0.8之间。

  若线性贮备溶液制备过程中为了增加药物的溶解度,可能会用到有机溶剂,除非经过验证外,有机溶剂的量均不得超过总体积的5%(v/v)。

  在回收率实验之前,应排除过滤器、滤膜或是玻璃材质仪器等对药物的吸附作用,避免对测定结果造成干扰。

  按处方比例混合的空白辅料+不同浓度的主成分对照品或原料,再按照拟定的质量标准配制溶液,必要时可超声使主成分溶解。

  在规定范围内,取同一浓度(相当于100%浓度水平)的供试品,用至少6份样品的测定结果进行评价;

  设计至少三种不同浓度,每种浓度至少平行配制3份,用至少9份样品的测定结果进行评价,回收率验证的浓度范围一般要求为限度的±20%。

  各浓度下的平均回收率应在98%-102%之间,相对标准偏差RSD应不大于2.0%。

  配制溶剂尽量与溶出介质体系一致。如果药物溶解性较差,可以将药物溶解在少量有机溶剂(一般不超过5%)中制备储备液,并用溶出介质稀释到最终浓度。

  主要评估溶出条件故意做微小改变时对溶出方法耐用性的影响。对于该实验,最好选用具有较好质量特征(如具有较好含量均匀度)的制剂批次进行,排除制剂个体差异对该结果造成的干扰。

  在此很多分析员有这样的疑问:如果溶出度测定方法与含量测定方法均为HPLC法,且色谱条件一致,可以共用一套耐用性数据吗?

  答案很明确,不可以!因为即使色谱条件一致,也会存在样品浓度和溶媒的不同,因此仍旧需要考察耐用性。

  同含量测定,需要考察柱温、流速、波长、色谱柱、流动相中有机相与水相比例及水相浓度和pH值。对于使用UV法测定的溶出度,照样需要考察耐用性,如波长、溶出介质浓度等。

  最重要一点:不管为了与QC完美对接,还是和厂家妥善交接,都需要验证不同品牌溶出仪之间的耐用性。

  包括批内均一性和批间均一性。这两项指标不但能检验药品本身质量特性是否符合规定,同时也可以检验溶出方法是否满足准确性、精确性的要求。

  可取同一批次产品的6或12个剂量单位测定溶出曲线,计算各取样时间点的RSD值。

  早期的一些取样时间点(如5min),要求RSD≤20%;其他时间点,要求RSD≤10%。

  取不同批次产品的6或12个剂量单位测定溶出曲线,比较各批次的溶出曲线是否相似。